新葡萄8883官网AMG人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM)ELISA试剂盒仅限于科学研究使用,严禁用于医学诊断。此外,该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),其检测原理如下:首先,将标本、标准品和HRP标记的检测抗体依次添加到预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育及彻底洗涤后,用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下,TMB由蓝色转变为黄色,其颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。测定吸光度(OD值)时,应选择450nm波长,并计算样品浓度。
新葡萄8883官网AMG试剂盒的组成包括96孔配置和48孔配置,具体如下:
- 微孔酶标板:96孔配置为12孔×8条,48孔配置为12孔×4条
- 标准品:03mL*6管
- 样本稀释液:6mL(96孔)或3mL(48孔)
- 检测抗体-HRP:10mL(96孔)或5mL(48孔)
- 20×洗涤缓冲液:25mL(96孔)或15mL(48孔)
- 底物A:6mL(96孔)或3mL(48孔)
- 底物B:6mL(96孔)或3mL(48孔)
- 终止液:6mL(96孔)或3mL(48孔)
- 封板膜:2张
- 说明书:1份
- 自封袋:1个
标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。试剂盒应储存在2-8℃的环境中,有效期为6个月。
样品收集、处理及保存方法:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免细胞刺激,收集血液后,进行3000转离心10分钟,以迅速分离血清和红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟,取上清。
- 细胞上清液:通过3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织与生理盐水混合后捣碎,进行3000转离心10分钟,取上清。
具备的设施及器材:
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:05-10 µL、2-20 µL、20-200 µL、200-1000 µL
- 37℃恒温箱
操作步骤及注意事项:
- 从冷藏环境中取出的试剂盒应在室温下平衡15-30分钟后方可使用,未用完的酶标板应装入密封袋保存。
- 洗涤液如有结晶析出,可加热帮助溶解,洗涤不影响结果。
- 所有加样步骤应使用加样器,并定期校对其准确性,确保一次加样控制在5分钟内。样本数量多时可使用排枪加样。
- 每次测定应同时制作标准曲线,复孔检测最佳。如样本OD值超出标准品的最大值,请提前用样品稀释液稀释。同时计算时需乘以总稀释倍数。
- 封板膜仅限一次性使用,以防止交叉污染。
- 必须严格按照说明书操作,试验结果需依据酶标仪读数。
- 底物应避光保存,所有样品、洗涤液和废弃物需按传染物处理。
- 不同批号的试剂组成不得混用。
新葡萄8883官网AMG提供免费的ELISA代测服务,所有购买本公司ELISA试剂盒的用户均可享受此服务,详细信息请咨询销售经理或在线客服。