随着生物医学领域的不断进步，对免疫系统功能的深入理解与精准测量显得尤为重要。酶联免疫斑点技术（ELISpot）作为一种高效的技术手段，在这方面发挥了关键作用。通过新葡萄8883官网AMG的ELISpot技术，研究人员能够准确地定量分析单一免疫细胞所分泌的细胞因子或其他分子，为免疫应答的研究开辟了新的方向。本期推文将带您走进ELISpot的世界，揭示免疫反应背后的奥秘。

ELISpot技术简介

酶联免疫斑点技术（Enzyme Linked ImmunoSpot Assay, ELISpot）是一种基于ELISA原理的创新细胞检测技术。ELISpot的历史可以追溯到1978年，当时牛津大学的Don Mason教授首次开发了检测抗体分泌细胞的“胶片上的斑点技术”。此后，科学家JD Sedgwick和C Czerkinsky于1983年独立发展了ELISpot技术，提出了酶联免疫的概念，并将其应用于斑点形成技术，使其更具实用性和灵敏度。

ELISpot能够检测单个细胞分泌的细胞因子或抗体，动态监测样本中活细胞的免疫状态。具体方法是将细胞培养在特异性捕获抗体的PVDF板中，细胞分泌的靶标蛋白通过特异性包被抗体捕获。经过适当的孵育后，去除细胞并加入生物素化抗体，最终通过酶促显色反应形成斑点（Spot）。

ELISpot技术具备高灵敏度、高通量筛选、活细胞功能评价和操作简便等优点，被广泛应用于疫苗研究、药物筛选、感染性疾病的诊断与研究、肿瘤免疫研究、自身免疫病研究、过敏研究以及移植中排斥反应的预测等多个免疫相关领域。

ELISpot技术进阶版——FluoroSpot

FluoroSpot是在ELISpot基础上发展而来的新技术，通过荧光检测取代了传统的比色法。它将不同波长的荧光团混合，能够实现多种细胞因子的准确检测，既保持了ELISpot的高灵敏度，又能同时分析多个细胞群体中分泌不同细胞因子的能力。例如，在三色FluoroSpot中，在96孔板的PVDF膜上同时包被IFN-γ、IL-17A和IL-22因子的捕获抗体，利用不同发射波长的荧光素标记，从而获得不同颜色的荧光斑点，便于数据分析。

ELISpot与ELISA对比

从技术本质上看，ELISpot与ELISA都是基于双抗夹心法原理，但二者有所不同。ELISA用于定量检测样本溶液中靶标蛋白的浓度，而ELISpot则实现对样本中活细胞免疫状态的动态评估。通过以下表格可以清晰地对比二者的不同：

总结

以上便是关于ELISpot的详细介绍。相信通过这篇文章，您对ELISpot有了更加全面的了解。得益于其独特的优势，ELISpot在疫苗开发和肿瘤免疫治疗等多个领域展现出巨大的潜力。随着科学技术的不断进步，新葡萄8883官网AMG相信ELISpot将为人类健康事业作出更大的贡献。欲了解更多ELISA相关知识，请持续关注新葡萄8883官网AMG。